大鼠股骨血管顯微外科技術(shù)

摘要：血管通路由于多種原因而被實(shí)驗(yàn)使用。在我們的實(shí)驗(yàn)室，我們實(shí)現(xiàn)動脈通路來記錄動脈壓力和靜脈通路來給予液體和藥物。我們提出了一種顯微外科技術(shù)，用于大鼠股動脈和靜脈通路。

在實(shí)驗(yàn)動物模型中，股動脈和靜脈通路允許分別記錄動脈壓和流體/藥物的給藥。在我們的實(shí)驗(yàn)室中，動脈壓力被用于一般生理監(jiān)測，以及實(shí)驗(yàn)干預(yù)期間的依賴變量，包括窒息、缺氧和高碳酸血癥，以及手術(shù)，包括去脊髓和脊髓半橫斷和橫斷術(shù)。靜脈通路允許我們在未麻醉的去大腦動物中給予液體和藥物，如維庫溴銨。

方法：在實(shí)驗(yàn)之前制備連個(gè)導(dǎo)管系統(tǒng)，一個(gè)用于動脈，一個(gè)用于靜脈。PE50切長約20厘米，用剃刀刀片切割45°角的尖端。PE50管固定在一個(gè)帶有三通旋塞的針上。另外兩個(gè)接口連接在充液注射器的連接口上。對于動脈系統(tǒng)，其中一個(gè)是1毫升注射器填充含300 U/L肝素的林洛二氏溶液中。另一個(gè)是5毫升注射器填充生理鹽水，林洛二氏溶液，或人工腦脊液。動脈導(dǎo)管系統(tǒng)用肝素和靜脈導(dǎo)管系統(tǒng)填充非肝素化溶液。旋塞閥被鎖定在導(dǎo)管插管方向上。

10只成年健康SD大鼠（340-38/0g），經(jīng)面罩使用異氟烷麻醉。用常規(guī)的三個(gè)小皮下電極測量心電圖（EKG），并使用音頻放大器和示波器進(jìn)行濾波和監(jiān)視。麻醉深度維持在一個(gè)水平，這樣就不會出現(xiàn)對后肢遠(yuǎn)端的收縮反應(yīng)的撤回反射和心率變化。在股骨區(qū)域平行于股骨鞘進(jìn)行皮膚切開。解剖軟組織暴露股神經(jīng)血管束。股動脈鞘采用鈍性解剖，沿其長軸在股動脈橫向和靜脈內(nèi)側(cè)引導(dǎo)。暴露了股骨血管，它們以相同的方式以鈍性解剖進(jìn)一步分離。股靜脈內(nèi)側(cè)回縮顯示股深靜脈。近端控制應(yīng)位于該分支的遠(yuǎn)端，以避免該血管通過隨后的靜脈切開部位逆行出血。使用4-0縫線進(jìn)行遠(yuǎn)端結(jié)扎，并在縫合線末端放置止血器，離結(jié)大約3厘米。止血夾的重量對容器施加理想的張力程度，以便于隨后引入導(dǎo)管。這是一個(gè)微妙而重要的點(diǎn)，尤其是動脈導(dǎo)管的插入。然后通過緊鄰股深靜脈的血管夾獲得近端控制。在遠(yuǎn)端結(jié)扎部位近一至二毫米處，通過虹膜切除剪，通過血管周長的上半部以45°角進(jìn)行靜脈切開術(shù)。在導(dǎo)管插入期間，旋塞閥在導(dǎo)管正確的方向上打開，并且在導(dǎo)管尖端處應(yīng)該存在流體氣泡，以防止空氣栓子引入血管系統(tǒng)。經(jīng)靜脈切開插入導(dǎo)管并推進(jìn)血管夾。此時(shí)，旋塞閥被鎖定在導(dǎo)管的方向上。然后將近端控制血管夾移走，導(dǎo)管向腹股溝韌帶遠(yuǎn)端推進(jìn)。導(dǎo)管用3個(gè)單結(jié)固定至股靜脈近端和遠(yuǎn)端。如果以上述方式應(yīng)用近端和遠(yuǎn)端控制，則在靜脈切開或?qū)Ч懿迦肫陂g沒有觀察到出血。但是在去除近端血管夾后推進(jìn)時(shí)可能出現(xiàn)非常緩慢的滲出。如果早期觀察到，可能是由于近端血管夾被放置在股深靜脈的近端。如果發(fā)生這種情況，導(dǎo)管的快速固定是必要的。通過打開導(dǎo)管，抽吸0.2毫升靜脈血，然后用1毫升的沖洗液來實(shí)現(xiàn)導(dǎo)管通暢的確認(rèn)。為了防止因動脈插管引起的缺血而吸收乳酸和組織分解產(chǎn)物，淋巴管可單獨(dú)排除在循環(huán)中，或可替代地包括在用于固定股靜脈導(dǎo)管的結(jié)中。淋巴管結(jié)扎近端和遠(yuǎn)端，用虹膜切除剪切斷，并檢查近端和遠(yuǎn)端淋巴漏。在我們的經(jīng)驗(yàn)中，從來沒有觀察到淋巴漏。如果發(fā)生，應(yīng)尋求近端和遠(yuǎn)端單獨(dú)結(jié)扎，特別是如果要在該區(qū)域進(jìn)行神經(jīng)記錄。

股動脈通路是通過股靜脈通路獲得的。股動脈側(cè)向縮回暴露股深動脈，緊鄰股深靜脈。在遠(yuǎn)端結(jié)扎后，以與前面所述的股靜脈相同的方式將張力施加到縫合線末端。近端血管控制是通過在股深動脈遠(yuǎn)端施加臨時(shí)血管夾來實(shí)現(xiàn)的。在遠(yuǎn)端結(jié)扎近端1～2 mm處切開動脈，插入導(dǎo)管（開放）并推進(jìn)血管夾。在動脈內(nèi)插入導(dǎo)管時(shí)比靜脈插入有更大的阻力，初始插入只允許尖端。動脈導(dǎo)管通過將動脈壁拉在導(dǎo)管上，推進(jìn)到近端夾，兩者都用外科器械固定；這明顯不同于靜脈導(dǎo)管插入。旋塞閥被鎖定在導(dǎo)管的方向上，去除近端控制血管夾，導(dǎo)管進(jìn)一步推進(jìn)到腹股溝韌帶。如果以上述方式應(yīng)用近端和遠(yuǎn)端控制，則在動脈切開、導(dǎo)管插入或推進(jìn)過程中從未觀察到出血。用3根單結(jié)固定導(dǎo)管近端和遠(yuǎn)側(cè)。導(dǎo)管通暢的確認(rèn)是通過觀察導(dǎo)管解鎖時(shí)動脈和遠(yuǎn)端導(dǎo)管尖端之間的動脈搏動。作為一種選擇，可以提取少量的血液，并沖洗類似的量，但這可能會向動物體內(nèi)引入少量的肝素，這可能導(dǎo)致進(jìn)一步手術(shù)準(zhǔn)備的輕度凝血障礙。當(dāng)導(dǎo)管被解鎖時(shí)，我們通常通過可視化正常動脈搏動來充分地保證動脈導(dǎo)管通暢。手術(shù)期間在手術(shù)部位放置浸泡過林洛二氏溶液的紗布，術(shù)后縫合切口。

結(jié)論：我們提出了大鼠的股靜脈和動脈顯微外科技術(shù)。確定股動脈和靜脈的深支是很重要的。重要的是在導(dǎo)管頂端引入一個(gè)流體氣泡導(dǎo)管，以防止引入空氣栓子，而后者對于動脈壓力波形的精確記錄至關(guān)重要。