飲用水的質(zhì)量要求與管理

飲用水是實驗動物生存的基本需求，飲用水中的有害物質(zhì)超標(biāo)可能損害實驗動物的健康，對動物機(jī)體產(chǎn)生不利的影響，降低動物實驗結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性，所以制定嚴(yán)格的實驗動物飲用水的質(zhì)量要求與管理規(guī)范十分必要。

一、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.總體原則

一般情況下，應(yīng)保證實驗動物能按其具體要求而獲得適宜而無污染的飲水，實驗動物飲用水的品質(zhì)應(yīng)符合人飲用水的標(biāo)準(zhǔn)。為保證水質(zhì)的質(zhì)量，必須定期監(jiān)測其pH、硬度、微生物狀況及化學(xué)物質(zhì)污染情況，特別是實驗動物飲用水的水質(zhì)可能影響實驗結(jié)果的研究項目。對于要求高純水的研究項目，可對水進(jìn)行處理或提純，以盡量減少或消除其污染物。水的處理方法應(yīng)當(dāng)合理選擇，因為有些飲用水的處理方法可能影響動物生理過程的改變、微生物區(qū)系的變化，或影響實驗結(jié)果。例如，經(jīng)氯化處理的自來水對有些種類的動物適用，但對另一些動物則有毒性，如水生動物。

供水裝置，如飲水管和自動飲水器，應(yīng)定期檢查以保證正常運(yùn)行。有時要訓(xùn)練動物使用自動飲水裝置。采用飲用水瓶的，最好是更換而不宜加灌，以防潛在的微生物交叉污染；如果是重新灌裝，則應(yīng)注意每只水瓶要放回原籠位置。

2.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB 14925-2010《實驗動物環(huán)境及設(shè)施》已做了明確規(guī)定，基礎(chǔ)級實驗動物飲用水應(yīng)符合GB 5749-2006《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》，清潔級及其以上級別實驗動物的飲水應(yīng)達(dá)到無菌要求。

歐美一些發(fā)達(dá)國家對飲用水的污染物的要求非常嚴(yán)格，而我國的飲用水標(biāo)準(zhǔn)對許多檢測指標(biāo)還沒有進(jìn)行強(qiáng)制性監(jiān)控。主要差異見表4-1。

屏障與隔離環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)的實驗動物飲用水必須符合GB 5749-2006標(biāo)準(zhǔn)。再進(jìn)行滅菌處理，滅菌效果應(yīng)符合相同實驗動物級別的寄生蟲、微生物控制標(biāo)準(zhǔn)GB 14922.1-2001、GB 14922.2-2011。

二、器皿的清洗消毒

(1)清除盛水器皿中的飼料、飲水等剩余物，采用中性洗滌劑水溶液洗凈附著的污物。

(2)清洗水槽中加入次氯酸鈉，濃度調(diào)至100～200ppm。

(3)將飲水瓶完全浸泡于水槽中，浸泡12～24h。

(4)用清水洗凈飲水瓶上附著的消毒液，水槽中消毒液重新更換。

(5)干燥后放在規(guī)定的清潔場所，并進(jìn)行必要的裹蓋，以防二次污染，待用。

三、滅菌方法

(一)普通級實驗動物飲用水滅菌處理

不強(qiáng)制要求滅菌處理，但應(yīng)防止二次污染的可能。移動式盛水器皿應(yīng)每次使用前進(jìn)行清洗、消毒、漂凈，固定式供水管、飲水嘴應(yīng)定期拆卸進(jìn)行徹底清洗、消毒、漂凈，方法同“盛水器皿(飲水盆、飲水瓶、瓶塞等)的清洗消毒”。

(二)清潔級及以上實驗動物飲用水應(yīng)經(jīng)過滅菌處理

一般采用高壓蒸汽滅菌和過濾除菌兩種處理方法。

1.高壓蒸汽滅菌操作程序

(1)高壓滅菌的條件，根據(jù)滅菌器的機(jī)種、性能、容量大小，以及被滅菌飲水的量、容量、形狀、污染程度等不同而不同，應(yīng)采用“液體”滅菌模式。

(2)將耐高壓蒸汽滅菌的清潔水瓶洗凈后，裝入飲水瓶容量80％的自來水(符合GB 5479-2006標(biāo)準(zhǔn))，蓋上經(jīng)清洗消毒過的飲水瓶塞，放入耐熱性飲水瓶容器中。

(3)在飲水瓶的適當(dāng)部位，貼上高壓滅菌用顏色指示劑，并用鉛筆注上日期、時間等。

(4)將裝有水瓶的容器放入高壓滅菌器，因為滅菌物是飲水(液體)，因此除此之外的東西(如墊料、飼料等)不能同時放入滅菌器一起滅菌。

(5)飲水的滅菌條件一般為121℃、40～50min。

(6)滅菌結(jié)束后，應(yīng)慢慢排放蒸汽，滅菌30min以上的飲水，冷卻時間要稍長一些，滅菌器門打開后，需靜止片刻再取出，以防止沸水噴出。

(7)滅菌后的飲水放在固定的潔凈場所保存，滅菌后及使用前應(yīng)檢查顏色指示劑的滅菌程度。

(8)用規(guī)定記錄紙記錄高壓滅菌器處理的日期、時間、條件、操作者、被滅菌物的種類和數(shù)量等。

2.過濾除菌操作程序

(1)沙濾系統(tǒng)：采用石英砂介質(zhì)過濾器，主要目的是去除原水中含有的泥沙、鐵銹、膠體物質(zhì)、懸浮物等顆粒在20μm以上對人體有害的物質(zhì)，自動過濾系統(tǒng)可以自動(手動)進(jìn)行反沖洗、正沖洗等一系列操作。

(2)活性炭吸附系統(tǒng)：采用活性炭過濾器，目的是為了去除水中的色素、異味、生化有機(jī)物、降低水的余氨值及農(nóng)藥污染和其他對人體有害的物質(zhì)。自動過濾控制系統(tǒng)可以自動(手動)進(jìn)行反沖洗、正沖洗等一系列操作。

(3)樹脂交換系統(tǒng)：采用優(yōu)質(zhì)樹脂對水進(jìn)行軟化，主要是降低水的硬度，去除水中的鈣鎂離子(水垢)并可進(jìn)行智能化樹脂再生。

(4)超濾系統(tǒng)：采用5μm孔徑精密過濾器使水得到進(jìn)一步的凈化，使水的濁度和色度達(dá)到優(yōu)化，保證RO系統(tǒng)安全的進(jìn)水要求。

(5)反滲透系統(tǒng)：采用反滲透技術(shù)進(jìn)行脫鹽處理，去除鈣、鎂、鉛、汞等對人體有害的重金屬物質(zhì)及其他雜質(zhì)，降低水的硬度，脫鹽率98％以上，生產(chǎn)出達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的純凈水。

(6)殺菌系統(tǒng)：采用紫外線殺菌器進(jìn)行再次殺菌。

四、普通級實驗動物飲用水質(zhì)量檢測

實驗動物飲用水質(zhì)量是指實驗動物設(shè)施供水管網(wǎng)末梢水質(zhì)狀況。檢測頻率一般為每半年一次，特殊情況應(yīng)增加檢測頻率。

(1)實驗動物飲用水的標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法采用《GB/T 5750.1-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法總則》。

(2)實驗動物飲用水水樣采集與保存采用《GB/T 5750.2-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法水樣的采集和保存》。

(3)實驗動物飲用水水質(zhì)分析質(zhì)量控制采用《GB/T 5750.3-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法水質(zhì)分析質(zhì)量控制》。

(4)實驗動物飲用水感官性狀和物理指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.4-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法感官性狀和物理指標(biāo)》。

(5)實驗動物飲用水無機(jī)非金屬指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.5-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法無機(jī)非金屬指標(biāo)》。

(6)實驗動物飲用水金屬指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.6-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法金屬指標(biāo)》。

(7)實驗動物飲用水有機(jī)物指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.7-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法有機(jī)物綜合指標(biāo)》及《GB/T 5750.8-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法有機(jī)物指標(biāo)》。

(8)實驗動物飲用水農(nóng)藥指標(biāo)檢測采用((GB/T 5750.9-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法農(nóng)藥指標(biāo)》。

(9)實驗動物飲用水消毒副產(chǎn)物指標(biāo)檢測采用((GB/T 5750.10-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法消毒副產(chǎn)物指標(biāo)》。

(10)實驗動物飲用水消毒劑指標(biāo)檢測采用(GB/T 5750.11-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)

檢驗方法消毒劑指標(biāo)》。

(11)實驗動物飲用水微生物指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.12-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法微生物指標(biāo)》。

(12)實驗動物飲用水放射性指標(biāo)檢測采用《GB/T 5750.13-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法放射性指標(biāo)》。

五、清潔級及以上實驗動物飲用水質(zhì)量檢測

屏障與隔離環(huán)境實驗動物飲用水的微生物檢測采用“無菌檢查法”(《中國藥典》，2010年版，三部附錄)的方法，其他指標(biāo)檢測同“普通環(huán)境實驗動物飲用水質(zhì)量檢測”。微生物指標(biāo)檢測一般每3個月一次，其他水質(zhì)指標(biāo)每半年一次。

六、滅菌效果評價

(一)普通環(huán)境實驗動物飲用水評價

普通環(huán)境實驗動物飲用水不強(qiáng)求進(jìn)行滅菌處理，但供水機(jī)構(gòu)應(yīng)進(jìn)行消毒處理，微生物指標(biāo)應(yīng)參考GB 5749-2006標(biāo)準(zhǔn)，不得含有病原微生物。

(二)屏障和隔離環(huán)境實驗動物飲用水高壓蒸汽滅菌效果評價

高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測主要選用以下3種方法。

1.實時檢測

實時檢測，又稱程序監(jiān)測。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器(壓力表、溫度表、計時表)、圖表、指示針、報警器等，指示滅菌設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測方法，每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行并作相應(yīng)記錄。

2.化學(xué)指示監(jiān)測

利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點，以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù)。常用的有以下幾種。

(1)自制測溫管：將某些化學(xué)藥物的晶體密封于小玻璃管內(nèi)(長2cm，內(nèi)徑1～2mm)制成。常用試劑有苯甲酸(熔點121～123℃)等。滅菌時，當(dāng)濕度上升至藥物的熔點時，管內(nèi)的晶體即熔化，滅菌完畢后雖冷卻再凝固，其外形仍可與未熔化的晶體相區(qū)別，此法只能指示溫度，不能指示熱持續(xù)時間是否已達(dá)標(biāo)，因此是最低標(biāo)準(zhǔn)。主要用于實驗動物飲用水滅菌溫度的監(jiān)測。

(2)3M壓力滅菌指示膠帶：此膠帶上印有斜形白色指示線條圖案，是一種貼在待滅菌的無菌包外的特制變色膠紙。其粘貼面可牢固地固定于飲水瓶表面，在121℃、20min后，膠帶100％變色(條紋圖案即顯現(xiàn)黑色斜條)。3M膠帶既可用于實驗動物飲用水滅菌溫度的監(jiān)測，又可在其表面填寫滅菌日期、時間、保質(zhì)期等內(nèi)容。

3.生物指示劑監(jiān)測

利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌，以測定熱力滅菌的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，本菌芽胞對熱的抗力較強(qiáng)，其熱死亡時間與病原微生物中抗力最強(qiáng)的肉毒桿菌芽胞相似。生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測時應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗包，每個試驗包中心部位放置生物指示劑2個，放在滅菌柜室的5個點，即上、中層的中央各一個點，下層的前、中、后各一個點。滅菌后，取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置55～60℃溫箱中培養(yǎng)48h至7天，觀察最終結(jié)果。若培養(yǎng)后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅，達(dá)到了滅菌要求。若變?yōu)辄S色渾濁，說明芽胞未被殺滅，滅菌失敗。

(三)屏障和隔離環(huán)境實驗動物飲用水過濾除菌效果評價

實驗動物飲用水過濾除菌效果評價同樣采用“無菌檢查法”(《中國藥典》，2010年版，三部附錄)，經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)不得有任何細(xì)菌生長方為合格。